2016年1月7日，2016年達科為生物第四屆流式培訓班—南京分站在南京醫科大學先知樓正式拉開帷幕。課程分為理論課與上機實驗，1月7日到8日是理論課程，1月9日到10日是流式上機實驗。

  1月7日上午，理論培訓8點半準時開始，由上海達科為公司總經理薛金奎做開場發言， 16年的首場流式培訓班選在南京醫科大學舉辦，大家的反響熱烈，給16年開了個好頭。并向各位學員介紹了達科為公司，以“引進新產品、新技術”為己任，以“實驗之友，服務質優”為服務宗旨，致力于為大家提供優質的產品與服務。

    首先做報告是來自南京大學醫學院侯亞義教授，高度評價我們達科為公司在流式實驗技術領域的貢獻，并分享了侯教授課題組在系統性紅斑狼瘡方面的研究。紅斑狼瘡（SLE）在人群中的發生率女性大大高于男性，15-45歲多見。與SLE和APC-T cell信號傳導有關，涉及到幾乎所有免疫細胞，關鍵的信號通路是TLR7，在TLR7配體的刺激下，小鼠發生類SLE樣病變。SLE患者IFN-alpha增高，提示和pDC相關。TLR8和TLR9經TLR7介導自身免疫疾病，TLR8和TLR9雙敲除鼠的脾臟增大，B細胞流式指標CD21，CD23，CD5和B220都有降低。SLE嚴重的病人中幾乎找不到B細胞，并產生大量自身抗體、IgG增加以及IL-6等細胞因子分泌發生變化。DC的CD80，CD86和MHC發生變化，記憶性T、CD4和CD8 T cell增加。候教授還闡述了對SLE病因的觀點，不合適的炎癥反應，引起免疫細胞的混亂而導致后期的免疫系統的不協調。

接下來是達科為儀器部梁鍇技術講解了細胞的精確計數，AO/PI雙熒光的原理和應用。

    第三場報告由南京醫科大學免疫學系王曉明教授與大家分享了發生中心的免疫應答和腸道上皮間淋巴細胞（IEL)的研究進展。講解了流式的應用，包括：表型分析、增殖、凋亡、抗原遞呈、磷酸化蛋白、以及細胞動態分布，還對Gpr18調控小腸上皮間淋巴動態平衡的課題思路進行了深入的闡述。Gpr18在T、B淋巴細胞和IEL中高表達。Gpr18的敲除使得IEL在腸道上皮和固有細胞層中的穿梭平衡被打破，細胞遷移收到抑制，而影響免疫細胞的成熟。

1月7日下午，首先是江蘇省人民醫院血液科吳雨潔副研究員講解了大量流式細胞技術在血液病診斷中的應用案例，尤其在淋巴細胞分群、白血病和淋巴瘤分型、微量殘留病灶的監測中起到重要作用。以及TCRVbeta共有24種抗體，流式檢測對微小殘留病灶的診斷有重要意義（需求量很大）。

    接著是中國科學院巴斯德所張曉明研究員講解了復雜流式技術在腫瘤免疫中的應用。目前科學界有基因組、蛋白組、轉錄組、表觀組、代謝組等概念，張教授提出細胞組學的概念，提出使用5-10ml的血液，既可以確定人的免疫狀態。用4-5個panel的組合，檢測70-80個指標，對疾病進行相關研究。張教授可以做到18色流式檢測，還分享了宮頸癌與Treg，乳腺癌和腫瘤浸潤細胞及預后研究中的重要作用。

茶歇過后由南京醫科大學一附院肝移植中心呂凌教授為大家作報告。呂教授剛剛做完一臺手術，就趕來給大家分享他在Treg研究中的心得。呂教授研究Treg用于移植排斥，介紹了Treg的眾多marker，包括FoxP3，Helios，Nrp1，CTLA-4，CD45RA，CD39，PD-1/PDL-1等。講解了Treg的抑制免疫、介導細胞凋亡、調節DC的抗原遞呈的功能。乙酰化、泛素化、microRNA對Treg的調節。肝臟移植排斥多為慢性排斥，對符合條件的肝移植病人，呂教授在體外成功誘導Treg后回輸病人，經多次回輸（7個月時間），逐步減去免疫抑制劑的使用，成功使得肝移植擺脫免疫抑制劑的使用。

    1月8日上午九點，第二天的理論課程開始了。首先是達科為生物工程中心周翔經理作報告。周翔經理講述了ELISPOT的原理、刺激劑的選擇、斑點結果判定以及ELISPOT的應用等。

接著是接著是南京醫科大學病原生物學系陳曉軍博士講解了DC不同亞群流式技術的分析， MΦ的染色及包括MΦ中M1、M2的分型，以及B細胞染色。其中主要講解了Th1、Th17和Treg刺激阻斷劑的細節，包括選擇使用的刺激物、阻斷劑、阻斷時間等，其中尤其提到BioLegend抗體質量非常好，還總結了2015年發表的免疫學相關文章。

    接下來由達科為免疫組技術王婷婷為大家講解了流式細胞術的工作原理和多色配色方案的解決，也講述了同型對照的選擇及儀器的設置和調節等。

    1月8日下午14點開始培訓，首先是中科院生化細胞所劉小龍教授課題組陳旭峰博士作報告，陳博士講解了多色流式細胞術的原理、技術特點以及其優缺點，并結合自己的實際案例給大家展示多色流式細胞術實際應用中的基本流程。同時，陳博士還給大家介紹多色流式細胞術在造血干細胞的分析純化、磷酸化研究、周期凋亡研究以及移植等多個方面的實際應用。最后，向大家闡述多色細胞術的一些注意事項。

 緊接著是上海市免疫學研究所沈蕾研究員闡述了當處于肥胖時，細胞缺氧引起死亡而產生慢性炎癥，并闡述了T、B細胞對肥胖引起的炎癥的調控，以及T細胞對巨噬細胞的影響進而影響胰島素分泌的變化和B細胞對糖代謝的影響。

  最后由達科為免疫組技術程華與大家分享了流式細胞術的應用，如胞內因子檢測，細胞凋亡，細胞周期等技術內容。

兩天充實而精彩的理論課程已圓滿結束，通過專家教授們的講解和分享，學員們表示收獲頗豐。接下來的9號到10號是為期兩天的流式上機操作，盡請期待。