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“小體積”卻有“大容量”,我們是不一樣的磁珠純化!

作者:admin 信息來源:達(dá)科為 日期:20190614 打印 字體:  
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Strep-tag?蛋白純化系統(tǒng)是基于生物素(Biotin)和鏈霉親和素(Streptavidin)之間的相互作用開發(fā)出來的親和層析蛋白純化體系。

IBA Lifescience經(jīng)過不斷的優(yōu)化,目前已經(jīng)研發(fā)出兩套成熟的Strep-tag?蛋白純化體系:

  • 二代Strep-tag? II & Strep-Tactin?

  • 具有更高親和力的三代Twin-Strep-tag&Strep-Tactin?XT

*想了解詳細(xì)系統(tǒng)介紹,請(qǐng)點(diǎn)擊查看:

IBA蛋白純化技術(shù)革新:第三代Strep-tag?系統(tǒng)

MagStrep “type3” XT beads

IBAStrep-tag?蛋白純化產(chǎn)品,除了預(yù)裝柱、?KTA?儀器預(yù)裝柱、填料等,還有專門針對(duì)小規(guī)模、高通量純化Strep-tag?融合蛋白的磁珠產(chǎn)品。

MagStrep “type3” XTbeads是由Strep-Tactin?XT涂布的磁珠,不僅可以純化含Strep-tag?的蛋白,還可以用于Pull-downRNA Co-IP實(shí)驗(yàn)(文末附有參考文獻(xiàn))。

技術(shù)優(yōu)勢(shì)

  •  高結(jié)合載量:~0.85 nmol/μl beads,相當(dāng)于可結(jié)合25.5 μg 30kDa的蛋白;

  •  低背景非特異性的結(jié)合少;

  • 靈活的洗脫方式loading buffer存在的條件下煮沸洗脫,或者使用Biotin將目標(biāo)蛋白從磁珠上洗脫;

  • Strep-tagIITwin-Strep-tag?的親和力極高歸功于磁珠上的Strep-Tactin?XT。

實(shí)驗(yàn)參數(shù)

圖1. 使用MagStrep “type3” XT beads從原始細(xì)菌提取物中純化GFP-Strep-tag融合蛋白。

使用Agilent Bioanalyzer 2100 System分析提取出來的蛋白,發(fā)現(xiàn)不管是直接以Buffer BXT (含Biotin)將靶蛋白洗脫下來,或是加入sample buffer煮沸來分離目標(biāo)蛋白,都能得到高純度的蛋白。

適用范圍

  • 樣本體積不超過2.5 ml;

  • 建議目的蛋白濃度>10 μg/ml;

  • 磁珠大小為25 μm,可做批量處理;

  • 不能重復(fù)使用。

綜合以上特點(diǎn),使用MagStrep “type3” XTbeads可得到極佳的純化效果。對(duì)于需要高純度蛋白的您,此磁珠是最適用于小規(guī)模、快速蛋白質(zhì)純化的工具。

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品

規(guī)格

貨號(hào)

磁珠

MagStrep  "type3" XT beads 5% suspension

2 ml

2-4090-002

相容磁座

Magnetic  Separator

for 24 reaction  tubes

2-1602-000

洗脫溶液

10x Buffer BXT;  Strep-Tactin?XT Elution Buffer

25 ml

2-1042-025

洗滌溶液

10x Buffer W;  Strep-Tactin?/Strep-Tactin?XT Wash Buffer

100 ml

2-1003-100

參考文獻(xiàn)

  • Protein purification

Essuman K, Summers DW, Sasaki Y, Mao X, Yim AKY, DiAntonio A, MilbrandtJ. (2018) TIR Domain Proteins Are an AncientFamily of NAD+ -Consuming Enzymes. Curr Biol. 28(3): 421-430.

Zhang Y, Ptacin JL, Fischer EC, Aerni HR, CaffaroCE, San Jose K, Feldman AW, Turner CR, Romesberg FE. (2017)A semi-synthetic organism that stores and retrieves increased genetic information. Nature. 551(7682): 644-647. 

  • Pull-down assay

González M, Brito N, González C. (2017)The Botrytis cinerea elicitor protein BcIEB1 interacts with the tobaccoPR5-family protein osmotin and protects the fungus against its antifungalactivity. New Phytol. 215(1): 397-410. 

Jeong, S. J., Park, S., Nguyen, L. T., Hwang, J., Lee, E. Y., Giong, H.K., ... & Kim, H. K. (2019).A threonyl-tRNA synthetase-mediated translation initiation machinery. NatureCommunications10(1), 1357.

Maidorn, M., Olichon, A., Rizzoli, S. O., & Opazo, F. (2019). Nanobodies reveal an extra-synaptic population of SNAP-25and Syntaxin 1A in hippocampal neurons. In MAbs (Vol. 11,No. 2, pp. 305-321). Taylor & Francis. 

  • RNA co-immunoprecipitation 

Chen Z, Mashburn-Warren L, Merritt J, Federle MJ, Kreth J. (2017) Interference of a speB 5' untranslated region partialdeletion with mRNA degradation in Streptococcus pyogenes. Mol OralMicrobiol.32(5): 390-403.


IBA Lifesciences(德國):IBA公司總部位于德國。二十年來,IBA以杰出的專利技術(shù)Strep-tag?系統(tǒng)為基礎(chǔ),發(fā)展出完整的產(chǎn)品組合,涵蓋重組蛋白表達(dá)丶純化與固定以及從全血或相關(guān)體液中分離特定細(xì)胞的技術(shù)。同時(shí),IBA也是全球領(lǐng)先的核酸合成專家,在DNARNA寡核苷酸的合成上已有超過二十年的經(jīng)驗(yàn),能根據(jù)客戶的選擇,生產(chǎn)含有特定染料或化學(xué)修飾的特殊寡核苷酸。



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